Számos, a PCR-kísérletekben általánosan használt enzim

Polimeráz láncreakció, rövidítve:PCRangolul egy molekuláris biológiai technika, amelyet specifikus DNS-fragmensek amplifikálására használnak.Speciális, testen kívüli DNS-replikációnak tekinthető, amely nagyon kis mennyiségű DNS-t képes nagymértékben megnövelni.Az egész alattPCRA reakció folyamatában az anyagok egy osztálya létfontosságú szerepet játszik – az enzimek.

1. Taq DNS

A korai időkben végzett kísérletekbenPCR, a tudósok az Escherichia coli DNS polimeráz I-et használták, De van egy probléma ezzel az enzimmel: minden ciklus során új enzimet kell pótolnia, ami kissé bonyolulttá teszi a műveleti lépéseket, és nehéz teljesen automatikusan amplifikálni.Ez a probléma megoldódott, miután a tudósok 1988-ban véletlenül izolálták a Taq DNS polimerázt a Thermus aquaticusból. Azóta a DNS automatikus amplifikációja valósággá vált.Ennek az enzimnek a felfedezése azt is tesziPCRa technológia egy kényelmes, praktikus és univerzális technológia.Jelenleg a Taq DNS polimeráz a leggyakoribb polimeráz a DNS kitekben.

2. PfuDNA

Mint fentebb említettük, a Taq DNase-nek van egy nagy hibája, ezért a tudósok bizonyos mértékig módosították a Taq DNS-polimerázt annak érdekében, hogy elkerüljék az össze nem illő amplifikációt, ami pontatlan teszteredményeket eredményez.De a Taq DNS polimeráz módosítása gátolja a DNS polimeráz aktivitását szobahőmérsékleten.A PfuDNS polimeráz jól tudja pótolni a Taq DNS polimeráz fenti hátrányait, így a PCR reakció normálisan lebonyolítható, és a célgén amplifikáció sikeressége hatékonyan javítható.

3. Reverz transzkriptáz

A reverz transzkriptázt 1970-ben fedezték fel. Ez az enzim RNS-t használ templátként, dNTP-t szubsztrátként, követi a bázispárosítás elvét, és az RNS-templáttal komplementer DNS egyszálat szintetizál 5′-3′ irányban.A reverz transzkriptáz elsősorban a DNS- vagy RNS-templátokból származó DNS polimeráz aktivitásától függ, ezért nincs 3'-5' exonukleáz aktivitása.Azonban RNáz H aktivitással rendelkezik, ami bizonyos mértékig korlátozza a reverz transzkriptáz szintézisének hosszát.A vad reverz transzkriptáz alacsony hűsége és termostabilitása miatt a tudósok módosították is.

MertPCRkísérletek során a fő fogyóeszközök a következők: egyedi PCR-cső, 4/8-szalagos PCR-cső, PCR-lemezek.

LabióéPCR fogyóeszközökrendelkezzen a következőkkelelőnyeit:

PCR lemezek: Széles körű termikus ciklus kompatibilitás;Nagy kontraszt, könnyű azonosítás;jól fluoreszcens visszaverődés;jóhőátadás;Tanúsított DNáz, RNáz, DNS, PCR inhibitorok és tesztelt pirogénmentes.

Egyedi PCR csövek: Párolgásálló; jóhőátadás;kiváló optikai tisztaság; Tanúsított DNáz, RNáz, DNS, PCR inhibitorok és tesztelt pirogénmentes.

4/8 csíkos PCR csövek: Ultra-vékony falak; nagy tisztaság; jó fluoreszcens visszaverődés;felhasználható a gyógyszeriparban, az élelmiszeriparban és a molekuláris biológiában; kiváló minőségű, szűz PP anyag; tanúsított DNáz, RNáz, DNS, PCR inhibitorok és tesztelt pirogénmentes.