Használhatók-e újra az ultraszűrő centrifugacsövek?Íme a válasz

A centrifugacső egy egyszerű cső, amely ellenáll a nagy forgási sebességnek és nyomásnak, például egyes minták elválasztására és a felülúszó üledékek szétválasztására.Az ultraszűrő centrifugacső két részből áll, hasonlóan a belső csőhöz és a külső csőhöz.A belső cső egy bizonyos molekulatömegű membrán.A nagy sebességű centrifugálás során a kisebb molekulatömegűek az alsó csőbe (azaz a külső csőbe) szivárognak, a nagyobb molekulatömegűek pedig a felső csőbe (azaz a belső csőbe) beszorulnak.Ez az ultraszűrés elve, és gyakran használják a minták koncentrálására.

Az ultraszűrő centrifugacsövek általában előkezelés nélkül is használhatók, de a fehérjeminta feldolgozásához, különösen a híg fehérjeoldatokhoz (< 10 ug/ml), az ultraszűrő membránokkal végzett koncentráció visszanyerési sebessége gyakran nem kvantitatív.Bár a PES anyagok minimálisra csökkentik a nem specifikus adszorpciót, egyes fehérjéknél, különösen ha hígak, problémák adódhatnak.A nem specifikus kötődés mértéke az egyes fehérjék szerkezetétől függően változik.A töltött vagy hidrofób domént tartalmazó fehérjék nagyobb valószínűséggel kötődnek visszafordíthatatlanul különböző felületekhez.Az ultraszűrő centrifugacső felületén végzett passzivációs előkezelés csökkentheti a fehérje adszorpciós veszteségét a membrán felületén.A legtöbb esetben az oszlop előkezelése a híg fehérjeoldat koncentrálása előtt javíthatja a visszanyerési sebességet, mivel az oldat kitöltheti a membránon és a felületen szabaddá vált fehérje adszorpciós helyeit.A passziválási módszer az, hogy az oszlopot 1 óránál hosszabb ideig nagyobb térfogatú passziváló oldattal előzetesen áztatják, az oszlopot desztillált vízzel alaposan átmossák, majd egyszer centrifugálják desztillált vízzel, hogy teljesen eltávolítsák a filmen maradó passzivációs oldatot. .Ügyeljen arra, hogy a fólia ne száradjon ki passziválás után.Ha később szeretné használni, akkor steril desztillált vizet kell hozzáadnia, hogy a film nedves maradjon.

Az ultraszűrő centrifugacsöveket általában nem lehet sterilizálni és újra felhasználni.Mivel egy tubus ára nem olcsó, sokan megpróbálják újrahasznosítani – a tapasztalat az, hogy a membrán felületét desztillált vízzel sokszor megtisztítják és egyszer-kétszer centrifugálják.A visszafelé centrifugálható kis csövet desztillált vízbe meríthetjük, majd fordítva többször is centrifugálhatjuk, így jobb lesz.Ugyanahhoz a mintához többször is használható, használaton kívül desztillált vízbe áztatható, de a bakteriális szennyeződést meg kell akadályozni.Ne keverje össze a különböző mintákat.Egyesek azt mondják, hogy 20% alkoholban és 1n NaOH-ban (nátrium-hidroxidban) való áztatás megakadályozhatja a baktériumok szaporodását és megakadályozhatja a kiszáradást.Amíg az ultraszűrő membrán behatol a vízbe, nem hagyhatjuk megszáradni.Mások azonban azt mondják, hogy tönkreteszi a membrán szerkezetét.Mindenesetre a gyártók általában nem támogatják az újrahasználatot.Az ismételt használat blokkolja a szűrőmembrán pórusméretét, és még folyadékszivárgást is okozhat, ami befolyásolja a kísérleti eredményeket.